< Back to previous page

Publication

Natural products as potential inhibitors of Advanced Glycation Endproducts (AGEs) and modulators of autophagy

Book - Dissertation

Al eeuwenlang voorzien geneeskrachtige planten de menselijke beschaving van remedies voor het behoud van de gezondheid en de bestrijding van ziekten. Tegenwoordig zijn natuurlijke bronnen nog steeds een startpunt voor het onderzoek naar geneesmiddelen. Ze trekken de aandacht voor hun potentiële toepassing als nieuwe therapeutische middelen bij de behandeling van hedendaagse ziekten met grote sociale en economische gevolgen, zoals diabetes type 2, hart- en vaatziekten). Er zijn verschillende mechanismen voorgesteld om de oorzaak van chronische aandoeningen te verklaren, en op biochemisch niveau correleert de eiwitglycatie (vorming van geavanceerde glycatie-eindproducten (AGEs)) met vele pathologische complicaties. Net als bij AGEs is autofagie in verband gebracht met een groot aantal pathologieën, waaronder hartziekten, kanker, neurodegeneratie, infectieziekten, diabetes en auto-immuunziekten. Daarom vertegenwoordigen AGEs en autofagie nieuwe therapeutische doelwitten in het onderzoek naar natuurlijke producten. Het doel van dit doctoraatsproject was het isoleren en identificeren van verschillende geselecteerde klassen van natuurlijke producten (polymethoxyflavonoïden (PMFs), biflavonoïden, quinazolinealkaloïden) uit vier verschillende plantensoorten: Citrus sinensis, Citrus depressa, Ginkgo biloba en Adhatoda vasica. Vervolgens werden hun eigenschappen als AGEs remmers en autofagie modulatoren geëvalueerd door middel van een reeks experimentele procedures. Het project omvatte gedetailleerd fytochemisch onderzoek door middel van verschillende chromatografische technieken: open kolom, flash en semi-preparatieve vloeistofchromatografie. De structuur van de verbindingen werd opgehelderd door 1D- en 2D- NMR-spectroscopie en massaspectrometrie. De preliminaire tests voor AGEs remmende eigenschappen van de verkregen zuivere verbindingen omvatten de runderserumalbumine (BSA) / glucose test, en evaluatie van de vorming van fructosamine-adducten en alfa-dicarbonylverbindingen. Omwille van bepaalde beperkingen van deze standaardmethoden werd een methode ontwikkeld om van niet-selectieve colorimetrische /fluorimetrische technieken te evolueren naar een meer betrouwbare methode op basis van chromatografie. Een HILIC UPLC/MS-methode moest worden ontwikkeld en gevalideerd, en werd daarna gebruikt om de AGEs remmende eigenschappen van enkel zuivere verbindingen en commercieel beschikbare standaarden te onderzoeken . Om de autofagie modulatie door enkele geïsoleerde zuivere verbindingen en commerciële standaarden te evalueren, werden verschillende testen gebruikt: LC3 detectie en kwantificering door western blot analyse, en de Cyto-ID autofagie detectie kit. Als onderdeel van het analytische werk werd een methode ontwikkeld en gevalideerd voor de kwantificering van vasicine - het belangrijkste chinazolinealkaloïde in de bladeren van Adhatoda vasica. Daarnaast werd de vastgestelde methode toegepast voor de kwaliteitscontrole van in de handel verkrijgbare kruidenproducten die Adhatoda poeder of -extract bevatten. In het algemeen zijn geavanceerde glycatie en modulatie van autofagie belangrijke oorzaken voor de progressie en pathogenese van veel chronische ziekten, en daarom kan het gebruik van gevalideerde methoden en technieken bijdragen tot de ondubbelzinnige ontdekking van nieuwe krachtige anti-AGEs en autofagie ­modulerende middelen.
Number of pages: 340
Publication year:2020
Keywords:Doctoral thesis
Accessibility:Open