Beckman Coulter Gallios flowcytometer.

Binnen het onderzoek van de beta-cel en het immuunsysteem is het essentieel van flowcytometrie technologie gebruik te kunnen maken. Dit situeert zich op verschillende niveaus. Eerst en vooral is er nood aan translatie van bevindingen uit het RNA en zelfs proteomics gebied, waarin algemene richtinggevende bevindingen de weg wijzen. De flowcytometrie apparatuur laat toe om op eiwit niveau bevindingen te bevestigen of te weerleggen. Het biedt bovendien de grote meerwaarde dat men op cellulair niveau de bevindingen kan lokaliseren binnen een heterogene celpopulatie, een hindernis die door de meer high-throughput technieken niet vlot kan genomen worden. Men kan op single-cell niveau simultaan een celtype identificeren en haar status na gaan m.b.t. viabiliteit (apoptosis/necrosis), cel-cyclus (rust/proliferatie), activatie (cel-specifieke activatiemerkers) en functie (cel-specifieke proteine-expressie zoals cytokinen, chemokinen). Dit biedt niet alleen meerwaarde binnen het diabetes onderzoek maar is essentieel in de andere armen binnen het onderzoek van alle partners: Frans Schuit en Chantal Mathieu beogen nieuwe inzichten te verwerven in beta-celfysiologie, in het bijzonder het proces van beta-celdood o.i.v. immunologische en metabole stress, signaaltransductiecascades die hierin betrokken zijn en cellulaire processen die een rol spelen bij in vivo beta-celdood. Flowcytometrie is essentieel voor de detectie van celoppervlaktemerkers en intracellulaire eiwitten op betacellen en immuuncelpopulaties, en dit in in vitro en in vivo assays. Mark Waer bestudeert in muismodellen van allogene hematopoietische stamceltransplantatie en posttransplant immuuntherapie hoe alloreactiviteitsreacties zich verhouden tot autoreactiviteit en antileukemische reactiviteit evenals de karakteristieken van marginale zone B cel-gemedieerde xeno-antistofproduktie in muismodellen van xenoharttransplantatie. Beide onderzoekslijnen vragen in vivo en in vitro experimentele opstellingen waarin simultane identificatie van celtype, gastheer/donor origine, en functionele status centraal staan, alsook meting van serum cytokines, serum antistoffen, en proliferatiereacties in vivo en in vitro (CFSE labeling). Roger Bouillon en Annemieke Verstuyf hebben voor hun onderzoek naar anti-kanker effecten van de analogen van vitamine D ook flowcytometrie nodig voor celcyclus analyse en opnieuw bevestiging op eiwit niveau in heterogene populaties van veranderingen in celprofiel geïdentificeerd met andere technieken. De gebruikers van de flowcytometer die buiten het consortium vallen gebruiken het toestel ook om celoppervlaktemerkers op allerlei celpopulaties na te gaan, zoals op immuuncellen (Jacques Pirenne) of op kankercellen (Brigitte Decallonne).

Trefwoorden:Beckman Coulter Gallios multicolor flowc

Disciplines:Laboratoriumgeneeskunde, Palliatieve zorg en zorg rond het levenseinde, Regeneratieve geneeskunde, Andere basiswetenschappen, Andere gezondheidswetenschappen, Verpleegkunde, Andere paramedische wetenschappen, Andere translationele wetenschappen, Andere medische en gezondheidswetenschappen