< Terug naar vorige pagina

Project

Ontrafelen van de rol van VPS13C in lysosomale homeostase en interorganellaire homeostase met behulp van nieuwe cellulaire en in vivo modellen.

Dementie is een van de belangrijkste aandoeningen in de huidige samenleving, waarbij dementie met Lewy-lichaampjes (DLB) ongeveer 25% van alle vormen van dementie vertegenwoordigt, slechts op de tweede plaats na de ziekte van Alzheimer. DLB omvat samen met de ziekte van Parkinson (PD) Lewy Body Diseases (LBD), een groep aandoeningen die wordt gekenmerkt door de aanwezigheid van Lewy-lichaampjes in de hersenen. De oorzaak van de vorming van Lewy-lichaampjes, evenals hun exacte rol bij de pathogenese van LBD, is echter nog onduidelijk. Onlangs zijn mutaties op het vacuolaire proteïnesorterende 13 homoloog C (VPS13C) -gen gevonden bij patiënten met de diagnose PD en DLB, wat dit gen benadrukt als een nieuwe cruciale speler in LBD. VPS13C lokaliseert naar late endosoom / lysosoom (LE / Lys) -endoplasmatisch reticulum (ER) en LE / Lys-lipide droplet (LD) contactplaatsen waar het waarschijnlijk functioneert bij het overbrengen van lipiden. Als zodanig is VPS13C functioneel betrokken bij het handhaven van een goede membraanhomeostase en interorganellaire communicatie. In de afgelopen twee jaar heeft het laboratorium een reeks tools ontwikkeld, waaronder nieuwe VPS13C-antilichamen en KO en geredde cellijnen, die de weg banen om VPS13C-functies in het lipidenmetabolisme en de lysosomale functie bloot te leggen. In dit doctoraat zullen we ons concentreren op het gebruik van iPSC's en in-vivo-modellen om de gegevens verkregen op geïmmortaliseerde cellijnen te valideren. iPSC's afgeleid van lymfocyten van patiënten met VPS13C-mutaties zijn al in huis verkrijgbaar. Ten eerste zal CRISPR / Cas9 genoombewerking worden gebruikt om isogene controles en VPS13C KO iPSC's te genereren. Van daaruit zullen neuronale voorlopercellen worden afgeleid die als basis zullen dienen om menselijke gedifferentieerde neuronen te verkrijgen. Door een samenwerking met Prof. Baekelandt (KU Leuven) hebben we toegang tot muis- en rat-α-synucleïne pathologie modellen. Met behulp van kort haarspeld-RNA zal VPS13C in deze modellen worden uitgeschakeld, terwijl virale vectoren die coderen voor VPS13C-mutanten samen met α-synucleïne worden geïnjecteerd. Zowel cellulaire als in vivo modellen zullen gebruikt worden om de impact van VP13C disfunctie op endolysosomale transportregulatie en interorganellaire communicatie te bestuderen. Deze kennis is nodig om te begrijpen hoe VPS13C-disfunctie leidt tot DLB / PD-pathologie, inclusief α-synucleïne-aggregatie, wat uiteindelijk resulteert in neuronale celdood in in-vivo-modellen.

Datum:15 sep 2020 →  Heden
Trefwoorden:Parkinson's disease, Dementia with Lewy Bodies, VPS13C, lysosomal, homeostasis
Disciplines:Neurofysiologie, Neurowetenschappen niet elders geclassificeerd
Project type:PhD project