Identificatie van het synaptische proteoom via plaatsspecifieke eiwitbiotinylatie

 De grote hoeveelheid aan neuronen in de hersenen van zoogdieren zijn onderling verbonden via een groot aantal cel-cel contacten, genaamd synapsen. Neuronen ontvangen verschillende soorten informatie op verschillende synapsen die anatomisch gescheiden zijn.  Naast verschillende lokalisaties hebben verschillende inputs hun eigen specifieke moleculaire, structurele en functionele kenmerken die hun identiteit bepalen. synapsidentiteit levert een belangrijke bijdrage aan de neuronale activiteit die nodig is voor gedrag en cognitie.  We weten echter heel weinig over de mechanismen die synapsen gebruiken om hun identiteit te verwerven of de eiwitten die elke synaps zijn specifieke morfologische en functionele eigenschappen verlenen. Dit project beoogt een methode te implementeren voor de identificatie van deze processen. We gebruiken CRISPR-Cas9-genoomtechnologie om eiwitten bij specifieke synapsen te labelen en vast te leggen via biotinylatie van de nabijgelegen omgeving. Deze krachtige techniek zal ons helpen de moleculaire identiteit van twee specifieke synapsen op hetzelfde postsynaptische neuron te achterhalen. De daaropvolgende vergelijking van deze moleculaire samenstellingen zal belangrijke aanwijzingen opleveren met betrekking tot de mechanismen die nodig zijn voor het verkrijgen en behouden van synapsidentiteit.