Een generisch platform voor de ontwikkeling van fluorescente biosensoren gebaseerd op aangepaste recombinante binders.

Genetisch gecodeerde fluorescente biosensoren zijn essentiële hulpmiddelen voor de in situ visualisatie en studie van chemische processen die plaatsvinden in levende cellen en meer complexe organismen. Er zijn momenteel echter weinig goedwerkende biosensoren beschikbaar omdat ze eiwitdomeinen vereisen die grote conformatieveranderingen vertonen als reactie op de stimulus, die moeilijk te vinden zijn. We stellen een strategie voor om biosensoren te ontwikkelen tegen een veel bredere verscheidenheid aan doelwitten, door nanobodies, specifieke varianten van antilichamen, zodanig te modificeren dat binding aan het doelwit resulteert in een sterke conformatieverandering. Deze conformatieverandering wordt vervolgens gebruikt om de emissie van een fluorescerende groep te moduleren, waardoor een fluorescerende biosensor wordt geleverd die volledig genetisch gecodeerd is en die gemakkelijk in cellen tot expressie kan worden gebracht. De beoogde strategie kan worden gecombineerd met elk nanobody dat nu of in de toekomst beschikbaar is, waardoor in situ biosensing wordt geopend voor een ongekende reeks doelen. De voorgestelde systemen zullen worden gedemonstreerd door beeldvorming van intracellulaire processen en door het visualiseren van de respons van tumoren op immunotherapie. Dit werk zal onze mogelijkheden voor het visualiseren van levende-celprocessen drastisch vergroten en tevens de basis vormen voor uitgebreid vervolgonderzoek.