Optimalisatie van de productie en formulering van zelfversterkende RNA en mRNA door middel van geavanceerde microfluïdica. (saRplix)

Dit project heeft als doel de structuur, synthese en formulering van sa-RNA en mRNA (sa-mRNA) systematisch te verbeteren. Ten eerste zullen we NSP's van andere alfavirussen onderzoeken om de efficiëntie van de niet-structurele eiwitten (NSP's) afgeleid van het Venezolaanse Equine Encephalitis-virus (VEEV) in ons huidige sa-RNA te verbeteren en hun intrinsieke immunogeniciteit en het effect ervan op het vaccinatiepotentieel te onderzoeken. Ten tweede streven we ernaar om door het wijzigen van de primaire structuur de stabiliteit van sa-mRNA te verbeteren, wat zowel de in vivo immunogeniciteit als de benodigde dosis voor vaccinatie kan beïnvloeden. Hoewel de productie van mRNA-vaccins zich primair heeft gericht op opschaling, is er een groeiende behoefte aan kleinschalige, snelle en flexibele productiecapaciteiten vanwege de opkomst van gepersonaliseerde geneeskunde. Een belangrijk knelpunt bij de productie van mRNA-gebaseerde vaccins is de vereiste voor grote volumes en de tijd die nodig is om te schakelen tussen verschillende sequenties. Nederlands We zijn van plan deze problemen aan te pakken met behulp van geavanceerde microfluïdische technieken om zowel enzymatische RNA-synthese, zuivering als de formulering van RNA in nanodeeltjes voor in vivo-afgifte te optimaliseren. Met behulp van een op trechters gebaseerde selectieprocedure zullen we de meest veelbelovende vaccinkandidaten in vitro en in relevante in vivo-modellen evalueren om hun chemische eigenschappen, intracellulaire afbraakkinetiek, opnamecapaciteit, expressieniveaus, biodistributie en immunogeniciteit te evalueren. We zullen goed gevestigde muistumormodellen zoals B16 en CT26 met gedefinieerde neo-epitopen gebruiken als model voor een gepersonaliseerde geneeskunde in de oncologie. Gezien het belang van het snel aanpassen van vaccinformuleringen als reactie op opkomende varianten van zorg bij infectieziekten, zullen we in de toekomst ook kandidaatvaccinformuleringen tegen nieuwe infectieziekten onderzoeken.